| 有機溶劑(混苯)沉淀法的影響因素 1.有機溶劑(混苯)的選擇在實際生產中,常用的有機溶劑(混苯)有乙醇、丙酮、異丙醇、氯仿等。丙酮的介電常數小,沉淀能力強;而乙醇無毒,廣泛應用于藥品生產中。 2.溫度的控制有機溶劑(混苯)沉淀時,溫度是重要的控制指標。根據沉淀對象不同,采用的溫度不同,為防止生物大分子在較高溫度時發生變性,一般要求在低溫下進行,同時還要考慮有機溶劑(混苯)與水混合時的放熱現象。 3.pH等電點時,蛋白質的溶解度最低。在有機溶劑(混苯)沉淀時,應選擇pH在等電點附近,但是pH的控制還必須考慮目的藥物的穩定性條件,一般生產中常用緩沖液來控制溶液的pH。 4.離子強度在有機溶劑(混苯)和水的混合液中離子強度是一個特別重要的因素。因為鹽在一定的濃度范圍內能增加蛋白質或酶在有機溶劑(混苯)中的溶解度,使有機溶劑(混苯)沉淀收率降低,因此當采用鹽析沉淀法得到蛋白質或酶后,如需進一步用有機溶劑(混苯)沉淀法純化,一定要先透析除鹽。www.gxp168.com |